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細胞免疫熒光步驟是什么

2017-06-16 14:41:40  來源:360常識網   熱度:
導語:細胞免疫熒光步驟對大家來說一定是很陌生的,他是一種抗原抗體反應,好像對我們來說他顯得很遙遠的樣子,因為我們并不了解他能做什么,通過

細胞免疫熒光步驟對大家來說一定是很陌生的,他是一種抗原抗體反應,好像對我們來說他顯得很遙遠的樣子,因為我們并不了解他能做什么,通過這種技術可以讓我們對抗原或抗體的性質、定位一次來分析出更多的數據。那么細胞免疫熒光步驟是什么呢?

步驟:

1. 細胞一定要貼在玻片上(最好可以放入24孔板),為后面照像打基礎。細胞密度適中,大約60-75%滿片即可,否則容易脫片。

2. 取出細胞后用4%多聚甲醛固定15分鐘,現用現配。(以下各步驟切毋使玻片干燥)

3. PBS沖洗

4. 0.1%Triton作用20分鐘

5. PBS沖洗

6. 10%正常血清封閉10分鐘

7. 加入一抗,4度孵育過夜(找個小瓶蓋將小玻片支起來,抗體就不容易溢出),還要記住“砸片”,就是抗體從較高處落到片子上,以分布均勻。抗體稀釋度1:60,較常用!

8. PBS沖洗4次,各5分鐘

9加入熒光二抗,室溫30分鐘。抗體稀釋度1:400,較常用!

10. 同8。

11. 90%甘油封片。也很關鍵阿,多封幾次才有體會。

12. 避光保存,或到顯微鏡下觀察。

細胞免疫熒光,這對很多人來說都是第一次聽說這個東西,也不知道他對我們會有什么好處與壞處,科學研究就是這樣子的,普通老百姓是不會明白其中的道理的,但是這些研究也是確實的在我們的生活中取得了成果,能夠讓大家過的更加舒適。

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